返回Google圖書搜尋

Iskanje inhibitorjeve HIV-1 reverzne transkriptaze v žveplenem lepoluknjičarju (Laetiporus sulphureus)

其他書名	Searching for HIV-1 reverse transcriptase inhibitors in sulphur shelf (Laetiporus sulphureus) : diplomska naloga
出版	Potočnik K., 2003
URL	http://books.google.com.hk/books?id=TDa2OQAACAAJ&hl=&source=gbs_api

註釋Virus HIV-1 je povzroèitelj epidemije bolezni AIDS, ki je zaèela narasèati v 80. letih 20. stoletja. V svetu je okuzenih ze okrog 42 milijonov ljudi, najveè na podroèju podsaharske Afrike. Iskanje novih uèinkovin proti virusu HIV-1 z molekulskim modeliranjem ali presejevanjem organskih spojin naravnega izvora, je zato nujno potrebno. Inhibitorji HIV-1 reverzne transkriptaze predstavljajo enega od naèinov zdravljenja infekcije z virusom HIV-1. Izmed sestih gliv, ki smo jih vzgojili na trdnem in tekoèem gojisèu in pripravili metanolne in metanolno-vodne izvleèke ter jih preizkusali z neradioaktivno ELISA metodo na encim HIV-1 reverzno transkriptazo v koncentraciji 1 mgžml, jegliva zvepleni lepoluknjièar (Laetiporus sulphureus) najbolj inhibirala encim. Vzorci metanolnih izvleèkov glive zveplenega lepoluknjièarja in gojisèaMalt, v katerem je le-ta rasla, so v koncentraciji 1 mgžml veè kot 90-%inhibirali encim, zato smo se odloèili, da bomo v nadaljevanju s kromatografskimi metodami loèili sestavine razliènih metanolnih izvleèkov. S kolonsko kromatografijo smo na 8 frakcij loèili matanolni izvleèek glive, ki je zrasla v gojisèu Malt. Frakcije 6, 7 in 8, ki so bolj polarne narave, so najbolj inhibirale encim, vendar le okrog 50-%. Metanolni izvleèek gojisèa Malt, v katerem je rasla gliva, smo loèili z izokratsko obratno-fazno tekoèinsko kromatografijo visoke loèljivosti. Uporabili smo zelo polarno mobilno fazoČ 15-% metanol v vodi, zbrali pa smo 9 frakcij. Rezultati preizkusanja so pokazali, da sta najbolj uèinkoviti prvi dve frakciji, ki sta inhibirali encim HIV-1 reverzno transkriptazo veè kot 90-%. Metanolni izvleèekglive, ki smo jo dobili v naravi, smo loèili s pomoèjo gradientne obratno-fazne tekoèinske kromatografije visoke loèljivosti. Frakcija 1 je v koncentraciji 1 mgžml inhibirala encim 96-%, v koncentraciji 0.1 mgžml 62-% inv koncentraciji 0.01 mgžml 28-%. S pomoèjo tankoplastne kromatografije in razliènih orositvenih reagentov smo poskusali se bolj natanèno doloèiti naravoinhibitorjev HIV-1 reverzne transkriptaze. Iz dobljenih rezultatov lahkozakljuèimo, da je najbolj uèinkovita frakcija 1, pridobljena z gradientnoobratno-fazno tekoèinsko kromatografijo metanolnega izvleèka glive, ki smo jo nabrali v naravi. Ta frakcija je zelo hidrofilne narave in vsebuje aminokisline ali biogene amine ter snovi s kislimi lastnostmi. Smiselno bi bilo zbrati se veè te frakcije, jo dalje frakcionirati ter identificirati posamezne spojine.