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Expressão de epítopos imunodominantes de Trypanossoma cruzi na proteína Lam B de Escherichia coli

出版	1995
URL	http://books.google.com.hk/books?id=t3_kHAAACAAJ&hl=&source=gbs_api

註釋Sistemas de expressão de epítopos em proteínas bacterianas foram desenvolvidos para a indução de resposta imune, visando efeito protetor contra patógenos. No entanto, esses sistemas poderiam também ser utilizados no mapeamento de epítoposapresentando vantagens técnicas e econômicas sobre o mapeamento empregando peptídeos sintéticos. Neste trabalho descrevemos o uso da proteína LamB como carregadora de seqüências dos antígenos repetitivos de T. cruzi, B13 e CRA, propondo autilização desse sistema no mapeamento de epítopos imunodominantes. Com este objetivo, uma única repetição dos antígenos B13 e CRA, escolhida aleatoriamente, foi inserida entre os aminoácidos 153 e 154 da proteína LamB, região localizada em alçavoltada para o exterior celular. A expressão da proteína LamB não foi alterada pela presença dos antígenos B13 e CRA, que foram detectados na superfície da célula por soros de coelhos imunizados com as proteínas de fusão GST-B13 e GST-CRA, contendo várias repetições dos antígenos B13 e CRA, respectivamente. As proteínas LamB/B13 e LamB/CRA foram purificadas da membrana da bactéria e usadas para imunizar camundongos. Apenas anticorpos contra a proteína LamB/B13 foram detectados nossoros dos animais imunizados, indicando que a repetição do antígeno CRA pode não ser imunogênica. As proteínas LamB/B13 e LamB/CRA foram testadas em ensaios de ELISA quanto ao reconhecimento por soros de pacientes chagásicos. A proteína La.